Questões sobre Biologia molecular

A terapia gênica envolve a substituição de um gene defeituoso ou mutado por outro do tipo selvagem ou sem mutação. Tal processo requer o uso de um vetor viral, e deve sempre ser realizada in vivo, diretamente na célula alvo do indivíduo a ser tratado, para evitar perda do vírus.

O southern é uma técnica que detecta fragmentos de DNA, podendo ser utilizada para averiguar, por hibridação com uma sonda radiotivamente marcada, a presença tanto de grandes rearranjos cromossômicos, quanto de mutações pontuais, de apenas um par de bases nitrogenadas.

Na técnica de PCR, para que seja possível a detecção de três isoformas distintas de um mesmo gene, a partir de um único par de primers (iniciadores), basta que eles se anelem a uma sequência que seja comum a todas as isoformas.

As enzimas de restrição, ou endonucleases, permitem que um gene seja clonado em um vetor, porém não permitem a ligação de mais de dois fragmentos, como por exemplo, dois insertos e um vetor.

Para se obter uma biblioteca genômica é preciso submeter o genoma do organismo de interesse a uma digestão com uma enzima de restrição e, em seguida, clonar individualmente os diversos fragmentos em um vetor desejável.

metilação do DNA.

translocação cromossômica.

splicing alternativo.

recombinação homóloga.

tradução.

sequências genômicas codantes, e portanto permitem excluir os suspeitos A e C, mas não permitem afirmar que o indivíduo B esteja associado ao crime em questão.

sítios de metilação ou ilhas CpG, que permitem afirmar que qualquer um dos suspeitos pode ser associado ao crime em questão, uma vez que bandas no sangue da vítima coincidem com algumas bandas das amostras recolhidas nos três suspeitos.

regiões não repetitivas ou intrônicas, as quais não permitem identificar o sangue nas roupas dos suspeitos como sendo da vítima em questão.

número variável de repetições em tandem, que permitem afirmar que o sangue na roupa do suspeito B é da vítima, assim como o sangue nas roupas dos demais suspeitos não é da vítima em questão.

regiões de perda de heterozigose, as quais permitem afirmar que o sangue na roupa do suspeito B é da vítima, mas não permite excluir a possibilidade de as outras amostras de sangue também o serem.

PTT (Protein Truncation Test) e DHPLC (Denaturing highperformance liquid chromatography).

Southern blotting e microarrays.

Reação em cadeia da polimerase (PCR) e SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism).

HA (Heteroduplex Analysis) e CSGE (Conformation Sensitive Gel Electrophoresis).