Os bacilos ácido-resistente possuem um envoltório que é resistente à coloração. Para que o corante penetre na célula, é necessário:
calor ou detergente (tergitol)
lavar o esfregaço com água corrente
lavar o esfregaço com água destilada
lavar o esfregaço com álcool-ácido
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